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鸡禽流感抗体检测亚博体育app苹果手机下载的操作方法及注意事项
发布时间:2019-08-15 点击量:16
? ? ? ?鸡禽流感抗体检测亚博体育app苹果手机下载用于评估养鸡场鸡禽流感疫苗免疫状况及感染鸡的血清学辅助诊断。本亚博体育app苹果手机下载采用间接ELISA法,在酶标板微孔上预包被禽流感抗原。在试验中,加入稀释后的待检血清,经过温育后,若样品中含有禽流感特异性抗体,则与包被板上的抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;加入酶标二抗,与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物;在微孔中加入TMB底物液,经酶催化形成蓝色产物,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
  鸡禽流感抗体检测亚博体育app苹果手机下载的操作步骤:
  1.取预包被的检测板(根据样品多少,可拆开分次使用),将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔,取阴性及阳性对照各100μl分别加入反应孔中,空白对照仅加入100μl样本稀释液。轻轻振匀孔中样品(勿溢出)。
  2.盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
  3.小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗涤液洗3次。每次用洗涤液注满板孔(约350μl),静置1分钟后甩掉。洗涤3次后在干净吸水纸上拍干。
  4.每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
  5.小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤3次,方法同2。切记在干净吸水纸上拍干。
  6.每孔先加底物A液50μl、再加底物B液50μl,混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
  7.每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
  鸡禽流感抗体检测亚博体育app苹果手机下载的注意事项:
  1.亚博体育app苹果手机下载使用前各试剂应平衡至室温,使用前应摇匀,使用后放回2~8℃。
  2.不同品种、不同批号亚博体育app苹果手机下载的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
  3.底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。
  4.TMB(底物B液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
  5.检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2~8℃)。
  6.所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
  7.严格遵守操作说明可以获得zui好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
  8.血清稀释板为一次性用品,不得重复使用;血清稀释板的较大容量为300μl/孔。

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